34 种细菌和真菌感染多重核酸检测试剂国家参考品
National Reference Panel for Multiplex Nucleic Acid Assay for
Identification of Infection of 34 Microorganisms
【类别】体外诊断试剂参考品
【批号】370026-201801
【性状】液体
【用途】本参考品为首批研制，参考品原料系 34 种可导致中枢神经
系统、血液、呼吸道、肠道以及生殖道感染的致病性细菌或真菌（以
下简称“病原菌”，不包括支原体和衣原体）的培养物。本参考品适
用于对人体样本或其培养物进行单次检测可报告 3 种及以上病原菌
检测结果的多重核酸检测试剂盒(实时荧光聚合酶链式反应法、恒温
扩增法、熔解曲线法以及靶向扩增二代测序法)部分性能要求的质量
控制和评价：阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、重复性及最低
检出限。
【组成和规格】本参考品由 7 支混合参考品组成。
类型 编号 规格 支数
混合参考品
M1 0.2ml/支 1
M2 0.2ml/支 1
M3 0.2ml/支 1
M4 0.2ml/支 1
M5 0.2ml/支 1
M6 0.2ml/支 1
M7 0.2ml/支 1
注：本参考品规格均不少于 0.2ml/支。
混合参考品 M1～M7 详细组成见下表。
编号 细菌和真菌 细菌或真菌 浓度
编号 细菌和真菌
及耐药基因
细菌和真菌
英文
浓度
CFU/ml
核酸浓度
copies/ml
M1
屎肠球菌 [vanA]
Enterococcus faecium 2×106 5.5×10 6
肺炎链球菌
Streptococcus pneumoniae 1×106 3.1×10 6
粘质沙雷氏菌
Serratia marcescens 1×107 7.4×10 6
大肠埃希氏菌*
Escherichia coli 2×106 3.4×10 6
表皮葡萄球菌
Staphylococcus epidermidis 2×106 2.3×10 6
M2
鲍曼不动杆菌
Acinetobacter baumannii 2×106 3.8×10 6
肺炎克雷伯菌 [KPC]
Klebsiella pneumoniae 2×106 3.7×10 6
热带念珠菌
Candida tropicalis 1×105 6.2×10 5
克柔念珠菌
Candida krusei 1×105 1.3×10 6
缓症链球菌
Streptococcus mitis 2×106 7.9×10 6
M3
粪肠球菌 [vanB]
Enterococcus faecalis 2×106 2.9×10 6
白色念珠菌
Candida albicans 1×105 5.1×10 5
产酸克雷伯菌
Klebsiella oxytoca 2×106 2.2×10 6
化脓链球菌
Streptococcus pyogenes 2×106 4.1×10 6
M4
流感嗜血杆菌
Haemophilus influenzae 1×106 8.7×10 5
光滑念珠菌
Candida glabrata 1×105 2.3×10 6
金黄色葡萄球菌 [mecA]
Staphylococcus au eus 5×106 2.6×10 7
奇异变形杆菌
Proteus mirabilis 1×106 1.9×10 6
无乳链球菌
Streptococcus agalactiae 5×106 1.0×10 7
M5
单核细胞增多性李斯特菌
Listeria monocytogenes 1×107 7.7×10 6
阴沟肠杆菌
Enterobacter cloacae 2×106 3.5×10 6
铜绿假单胞菌
Pseudomonas aeruginosa 2×106 4.4×10 6
近平滑念珠菌
Candida parapsilosis 1×105 3.7×10 5
脑膜炎奈瑟菌
Neisseria meningitidis 2×106
5.0×10 6
M6
滕黄微球菌
Micrococcus luteus 2×106 1.9×10 6
马红球菌
Rhodococcus equi 2×106 2.1×10 6
格氏李斯特菌
Listeria grayi 2×106
5.3×10 6
琼氏不动杆菌
Acinetobacter junii 2×106 2.7×10 6
副流感嗜血杆菌
Haemophilus parainfluenzae 1×107 1.1×10 7
M7 干燥奈瑟氏菌
Neisseria sicca 2×106 3.6×10
荧光假单胞菌
Pseudomonas fluorescens 2×106 3.2×10 6
嗜水气单胞菌
Aeromonoas hydrophila 2×106 9.4×10 5
葡萄牙念珠菌
Candida lusitaniae 1×105 1.7×10 6
嗜肺军团菌
Legionella pneumophila 2×106 3.4×10
注：*本参考品中的大肠埃希氏菌属于 O157:H7 血清型。
vanA/B，万
古霉素耐药基因 A/B；
KPC，碳青酶烯耐药基因；
mecA，甲氧西林耐
药基因。
【使用方法和要求】
1.操作步骤
参考品复溶及稀释：所有参考品平衡至室温后，加入 0.5 ml 无
核酸酶无菌水或试剂盒说明书中规定的稀释基质复溶，并按适当比例
进行稀释后使用，稀释比例参考“2.检测标准”；
核酸提取：所有参考品均需进行核酸提取，使用试剂盒说明书中
推荐的核酸提取试剂盒操作，用来评价重复性的参考品应平行提取
10 次，其余参考品评价 1 次；
检测及判定：依据本企业试剂盒说明书进行检测和判定。
2.检测标准
1）阳性参考品符合率
检测经稀释（终浓度不低于 1.0×10
5 CFU/ml）的参考品 M1～
M7，在试剂盒检测范围内的病原菌均应检出，且与已知型别相
符；
2）阴性参考品符合率
检测经稀释（终浓度不低于 1.0×10
5 CFU/ml）的参考品 M1～
M7，不在试剂盒检测范围内的病原菌均不应检出；
3）重复性
检测稀释至低浓度（不高于试剂盒宣称的最低检出限的 5
倍）的参考品 M1～M7，分别重复检测 10 次，在试剂盒检测范围
内的病原菌均应检出，且与已知型别相符；
4）最低检出限
检测经 10 倍梯度稀释至试剂盒宣称的最低检出限以下的参
考品 M1～M7，终浓度为试剂盒宣称的最低检出限以上时，在试
剂盒检测范围内的病原菌均应检出，且与已知型别相符。
【包装】西林瓶
【贮藏】长期保存应置于-20℃以下。
【注意事项】
1.本参考品短时间内（如不超过 5 天）可 2-8℃及更低温度条件下运
输。复溶后建议尽快使用并避免 3 次以上反复冻溶。
2.对于在试剂盒检测范围内但本参考品未覆盖的病原菌，企业应使用
其他适用的国家参考品或企业参考品对试剂盒进行质量评价。
3.使用本参考品进行质量评价时如果发生非特异反应，在企业充分证
明该非特异反应不影响试剂盒主要性能，且在试剂盒说明书中显著位
置予以说明的前提下，可以接受。
4.本参考品不适用于单次检测可报告 1 种或 2 种病原菌的试剂盒；不
适用于单次检测可报告 1 种或 2 种病原菌的多个靶基因的试剂盒；不
适用于单次检测可报告 1 种或 2 种病原菌的多个型别（基因型或血清
型）的试剂盒。
5.本参考品虽经灭活处理，但在使用过程中仍应按照传染性物质进行
处理，操作应按实验室安全管理条例执行。
6.细菌和真菌的浓度单位菌落形成单位每毫升（colony forming unit
per milliliter，CFU/ml），应用梯度稀释培养法测定；核酸浓度单
位为拷贝每毫升（copies per milliliter，copies/ml），应用数字
PCR 法测定。