体外细胞毒性试验阴性对照品
Negative control for in vitro cytotoxicity
【类别】医疗器械标准物质
【批号】350025-202401
【性状】白色固体粒料
【用途】用于医疗产品中细胞毒性体系控制与验证
【组成】聚乙烯
【细胞存活率】使用本品进行体外细胞毒性试验（MTT 法），细胞存
活率范围为：大于 70%
【使用方法和要求】
本品使用常规培养基（10%胎牛血清、2% 4mM 谷氨酰胺、88%不含
酚红 MEM 培养基, 配制好的完全培养基在 4℃条件下贮存不宜超过两
周）进行浸提。浸提方法如下：无菌操作，取 1g 本品放置于容器中，
按照 0.2g/mL 浸提比例加入浸提介质完全培养基，竖直放置振荡，
120rpm,37℃条件下震荡浸提 24h，取浸提液用于试验。完全培养基
置于同样的容器中，120rpm,37℃条件下震荡浸提 24h，用作空白对
照。
体外细胞毒性试验采用 MTT 法进行检测：取状态良好的 L929 细
胞，消化离心，配制成 1×10 5
/mL 细胞悬液接种于 96 孔培养板，每组应设立多个复孔，每孔接种 100μL 细胞悬液，置 37℃、5%二氧化
碳的 CO2 培养箱培养 24h。弃去原培养液，每孔加入 100μL 浸提液，
于 CO 2 培养箱继续培养。24h 后，放置于显微镜下观察细胞形态。弃
去孔内液体，每孔加入 50μL 1mg/mL 的无菌 MTT 溶液（MTT 注意现用
现配），继续培养 2h 后弃去孔内液体，加入 100μL 异丙醇，振荡混匀，
在酶标仪 570nm 和 650nm 波长下测定吸光度，计算细胞存活率。细胞
存活率计算公式如下：