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		枯草芽孢杆菌革兰氏如何染色和如何检测的步骤

　　枯草芽孢杆菌革兰氏染色的具体步骤如下：

　　1、首先就是涂片：将培养14-16小时的枯草芽孢杆菌涂片（注意期间涂片切不可过于浓厚），干燥、固定。固定时通过火焰1-2次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。

　　2.染色：（1）初染加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗。（2）媒染滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。（3）脱色将载玻片上面的水甩净，并衬以白背景，用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20-30秒钟，立即用水冲洗酒精。（4）复染用番红液染1-2分钟，水洗，吸干水分。（5）镜检干燥后，置油镜观察。革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。

　　革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如果脱色过度，阳性菌可被误染为阴性菌，而脱色不够，阴性菌可被误染为阳性菌。除此以外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈阴性反应。atcc菌种购买

　　革兰氏染色法鉴定枯草芽孢杆菌

　　一、实验目的掌握革兰氏染色技术

　　二、基本原理：染色的基本步骤是：结晶紫初染，碘液媒染，乙醇脱色，番红复染。经染色后，保留初染剂蓝紫色的为革兰阳性菌，染上复染剂颜色（红色）的为阴性菌。革兰氏阳性菌细胞壁的肽聚糖为网状结构，壁厚，类脂含量低，乙醇脱色时细胞壁脱水、肽聚糖层网状结构孔径缩小，透性降低，使结晶紫-碘的复合物不宜被洗脱保留在细胞内，复染后仍保留初染剂的蓝紫色。阴性菌肽聚糖层较薄，类脂含量高，脱色时，类脂溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘的复合物较易被洗脱，复染后，染上复染剂的红色。

　　三、器材：培养48h枯草芽孢杆菌菌落革兰氏染色液

　　四、操作步骤：1.制片常规涂片、干燥、固定2.初染结晶紫1min，水洗。3.媒染碘液1min，水洗。4.脱色95%酒精流加至洗出液无紫色，立即水洗5.复染番红复染约2min，水洗。6.镜检先低倍找到要观察区域，再高倍找到合适的视野，最后观察7.油镜的清洗及载玻片清洗。

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