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枯草芽孢杆菌革兰氏如何染色和如何检测的步骤
      

  枯草芽孢杆菌革兰氏染色的具体步骤如下:

  1、首先就是涂片:将培养14-16小时的枯草芽孢杆菌涂片(注意期间涂片切不可过于浓厚),干燥、固定。固定时通过火焰1-2次即可,不可过热,以载玻片不烫手为宜。
  2.染色:(1)初染  加草酸铵结晶紫一滴,约一分钟,水洗。(2)媒染  滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。(3)脱色  将载玻片上面的水甩净,并衬以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20-30秒钟,立即用水冲洗酒精。(4)复染  用番红液染1-2分钟,水洗,吸干水分。(5)镜检  干燥后,置油镜观察。革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。
  革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度,如果脱色过度,阳性菌可被误染为阴性菌,而脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。除此以外,菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分菌自行溶解了,都常呈阴性反应。atcc菌种购买

  革兰氏染色法鉴定枯草芽孢杆菌

  一、实验目的掌握革兰氏染色技术
  二、基本原理:染色的基本步骤是:结晶紫初染,碘液媒染,乙醇脱色,番红复染。经染色后,保留初染剂蓝紫色的为革兰阳性菌,染上复染剂颜色(红色)的为阴性菌。革兰氏阳性菌细胞壁的肽聚糖为网状结构,壁厚,类脂含量低,乙醇脱色时细胞壁脱水、肽聚糖层网状结构孔径缩小,透性降低,使结晶紫-碘的复合物不宜被洗脱保留在细胞内,复染后仍保留初染剂的蓝紫色。阴性菌肽聚糖层较薄,类脂含量高,脱色时,类脂溶解,细胞壁透性增大,使结晶紫-碘的复合物较易被洗脱,复染后,染上复染剂的红色。
  三、器材:培养48h枯草芽孢杆菌菌落革兰氏染色液
  四、操作步骤:1.制片常规涂片、干燥、固定2.初染结晶紫1min,水洗。3.媒染碘液1min,水洗。4.脱色95%酒精流加至洗出液无紫色,立即水洗5.复染番红复染约2min,水洗。6.镜检先低倍找到要观察区域,再高倍找到合适的视野,最后观察7.油镜的清洗及载玻片清洗。
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